ПЦР позволяет многократно амплифицировать участок ДНК, используя олигонуклеотидные праймеры и термостабильные ДНК- полимеразы. Первые методы анализа, такие как дот- блоттинг, были очень популярны благодаря своей простоте и скорости, с которой можно было получить результат.
Однако они не обладали такой разрешающей способностью, как метод ПДРФ. Кроме того, было трудно определить ДНК- профили для смеси образцов, таких как вагинальный мазок у жертв сексуального насилия. К счастью, метод ПЦР был легко адаптирован для анализа локусов тандемных повторов. В СШАФБР стандартизировало набор из 1. ДНК- профилирования, а также организовало объединённую базу данных ДНК «Combined DNA Index System (CODIS)» для судебно- медицинской идентификации в уголовных делах. Подобные анализы и базы данных были созданы и в других странах.
История возникновения дактилоскопии. Вид, курсовая работа.
Кроме того, разработаны комплекты инструментальных средств, которые позволяют анализировать одиночный нуклеотидный полиморфизм (ОНП). Метод ДНК- профилирования, используемый в настоящее время, основан на методе ПЦР и использует короткие тандемные повторы (КТП).
В этом методе анализируются участки с высокой степенью полиморфизма, которые имеют короткие повторяющиеся последовательности ДНК (наиболее распространённым является 4 базовых повтора, но встречаются и другие длины повтора, в том числе 3 и 5 пар оснований). Поскольку разные люди имеют разное число повторяющихся звеньев, эти участки ДНК могут использоваться для установления различий между индивидуумами.
К участкам генома,содержащих КТП, подбирают специфичные олигонуклеотидные праймеры, затем с помощью ПЦР амплифицируют соответствующие фрагменты ДНК. Эти фрагменты ДНК затем разделяются и распознаются с помощью электрофореза. Есть два распространённых метода разделения и распознавания: капиллярный электрофорез (КЭ) и гель- электрофорез. Для сильно деградированных био- образцов иногда бывает невозможно получить достаточное количество ядерной ДНК.
В таких ситуациях анализируется митохондриальная ДНК (мт. ДНК), поскольку в клетке существует много копий мт. ДНК, тогда как ядерной ДНК может быть не более 1- 2 копий.
Митохондриальный анализ является полезным дополнением при идентификации в таких случаях, как поиск пропавших без вести лиц, когда имеются только родственники, связанные по материнской линии. Митохондриальная ДНК может быть получена из таких био- материалов, как волосы (с корнем), старые кости или зубы. Этот метод, в частности, был использован в установлении того факта, что одна из наиболее известных в мире самозванок Анна Андерсон на самом деле не являлась великой русской княжной Анастасией Николаевной Романовой, за которую она себя выдавала. В 2. 00. 4 году анализ ДНК позволил пролить новый свет на таинственное исчезновение в 1. Бобби Данбара, четырёхлетнего мальчика, который пропал во время рыбалки.
Он, якобы, был найден живым спустя восемь месяцев, но женщина по имени Джулия Андерсон утверждала, что мальчик является её сыном, Брюсом Андерсоном. Суд не поверил ей, и мальчик был передан в семью Данбаров. Однако тест ДНК в 2.